產品描述
本品是在具有大腸桿菌BL21菌株基礎上制備的化學轉化感受態細胞，補充大腸桿菌缺乏的6種稀有密碼子（AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA）對應的tRNA，提供外源基因（尤其是真核基因）在原核系統中的表達水平。經pUC19質粒檢測，轉化效率可達107 cfu/μg。
本品具有氯霉素抗性。Rosetta(DE3) Competent Cell Rosseta(DE3)感受態細胞
運輸和保存方法
干冰運輸。
Rosseta(DE3)感受態細胞于-80℃保存，pUC19質粒≤-20℃保存。有效期半年。
注意事項
1）感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用，避免反復凍融。
2）待轉化DNA加入感受態細胞后，請勿用移液槍吹打，輕輕彈勻即可。
3）為確保*高效率轉化，整個操作過程應盡量輕柔，并保持低溫。Rosetta(DE3) Competent Cell Rosseta(DE3)感受態細胞
4）本品應于-80℃保存，請勿將感受態細胞儲存于-20℃或液氮中保存。
5）整個轉化過程請于無菌條件下操作。
6）為了您的**和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
1）將感受態細胞從-80℃中取出，置于冰水浴中融化。
2）將待轉化DNA加入到100 μl感受態細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育30分鐘。
Rosetta(DE3) Competent Cell Rosseta(DE3)感受態細胞【注】：① 通常100μl感受態細胞能夠被1ng超螺旋質粒DNA所飽和；
② 待轉化DNA加入體積不要超過感受態細胞體積的1/10。
3）42℃水浴，不要晃動，準確熱激45s后，立刻置于冰水浴中，靜置2-3分鐘。
4）向離心管中加入900 μl 不含***的LB或SOC培養基，混勻。
5）150 rpm, 37℃振蕩培養45分鐘，使菌體復蘇，抗性基因表達。
6）取適量已轉化細胞，加到含相應***的固體培養基上，輕輕涂勻。剩余菌液可在4℃保存，一周之內都可重新涂板。
【注】：如菌體量較少，也可2,500 g離心5分鐘，去掉900 μl上清。用剩余培養基將菌體重懸，用無菌涂布棒在含有正確抗性的平板上輕輕涂勻。
7）室溫正置10分鐘。待菌液被平板吸收后，37℃倒置培養過夜。Rosetta(DE3) Competent Cell Rosseta(DE3)感受態細胞
